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全自動型生物分子相互作用分析系統
品牌介紹:
Nicoyalife成立于2014年,是滑鐵盧大學科技孵化器重點培養的納米科技公司,并獲得加拿大政府創新資金支持。Nicoyalife致力于納米光子學基礎上的傳感器技術研究,并推出創新的ILSPR技術*,為基礎研究,藥物研發及醫學診斷提供高靈敏的蛋白及分子互作分析儀器。美國號: US8693003 B2
全自動型生物分子相互作用分析系統
產品介紹:
OpenSPR-XT將為科研及工業用戶帶來一款全自動,高通量的分子binding動力學SPR分析儀,大大加速用戶的研發過程。OpenSPR突出的性能和吸引力的價格,將*顛覆目前的全自動SPR市場。
OpenSPR-XT擁有*的納米傳感器技術,以廣受贊譽的OpenSPR作為檢測基礎,結合自動化工作站,提供高質量的分子互作數據,如binding動力學,吸附和蛋白,抗體,核酸,小分子等的特異性
應用舉例:
多肽和鈣調蛋白結合動力學分析
鈣調蛋白CaM是一種能與鈣離子結合的蛋白質。OpenSPR用來檢測野生型CaM和NOS肽的結合、解離速率及親和力。使用TraceDrawer 軟件處理數據,解離速率Koff:3.34x10-4 s-1 結合速率Kon 1.56x105M-1s-1、親和力常數KD 2.20 nM。結果與之前文獻報道的親和力常數相符。
前列腺特異抗原(PSA) 和抗體 (anti-PSA) 高親和力相互作用動力學分析
在很多研究領域中需要測定抗原-抗體結合動力常數。OpenSPR 方便用戶更準確測定配體-抗原的結合動力學。OpenSPR用來測定前列腺特異抗原(prostate specific antigen ,PSA) 和抗體 (anti-PSA)的相互作用。PSA結合數據動力學擬合,得到解離速率Koff和結合速率Kon分別為
1.8x10-4 (+/-2.1x10-6) s-1,4.03x104(+/-9.16x102) M-1s-1,親和力KD為4.5nM.如圖1和圖2,與之前文獻報道的PSA和anit-PSA相互作用數據*。
由于相互作用解離速率慢,需要進行單獨的解離實驗。分3次加入300nM PSA,平均反應為70pm +/-2.3pm, 傳感器反應的重復性為 CV =3.2% 如右圖。
以上結果表明 OpenSPR可以準確測定抗原抗體相互作用的動力學速率。
SPR分析生物素-鏈霉親和素相互作用
鏈霉親和素streptavidin 和 生物素biotin 的結合結果總結在Table 1 和 Figure 1中。當streptavidin流過生物素化的傳感器表面,存在顯著濃度依賴。由于streptavidin 和 biotin結合的高親和力,沒有觀察到解離過程。 1 nM低濃度時(18 pm response)觀察到表明OpenSPR儀器的高靈敏性。1min內信號的標準方差小于 2 pm,揭示了優異的信噪比。
對照實驗(Figure 2) 表明沒有biotin結合到表面上時, 500 nM 和 1000 nM時,streptavidin結合很少。然后用biotin激活表面,觀察到streptavidin結合。確認傳感器是有活力的。
Streptavidin和金顆粒非特異結合,但running buffer的組成可以有效抑制任何非特異結合。
這些結果表明biotin-streptavidin 對于 OpenSPR系統使用者來說是個很優異的分析體系。
技術參數
流動池 | PDMS,3μl |
傳感器 | 納米金粒子 |
泵流速 | 20-150μl/min |
靈敏度 | 5pg/mm2 |
自動化 | 全自動 |
RI分辨率 | 10-4-10-5RIU |
折射指數范圍 | 任意 |
RI DRIFT/5min | 10-5 RIU |
溫度靈敏度 | 10-5 RIU/℃ |
加樣 | 20-4500μl |
溫度 | 室溫 |
通道 | 單通道 |
濃度范圍 | 0.1nM-1mM |
分析軟件 | TraceDrawer |
儀器尺寸 | 30×55×53cm |
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