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隨著生物質譜技術的快速發展,蛋白質和多肽分析的分辨率、靈敏度、準確性、鑒定能力大為提高。尤其是Top-down蛋白質鑒定方法大量使用后,傳統的一維、二維電泳或液相色譜等樣品制備技術已經不能滿足需要。分析前如何降低樣品的復雜程度、獲得完整蛋白質、富集低豐度蛋白質、降低高豐度蛋白質對低豐度蛋白質的干擾、保留蛋白質的各種翻譯后修飾狀態、提高樣品處理通量等,已成為蛋白質樣品制備方法的重要前提。
美國Protein Discovery公司(現已被英國Expedeon公司收購)推出了一套新穎的蛋白質分組系統—Gelfree 8100。該系統使用凝膠洗脫液相組分截留電泳技術(gel-eluted liquid fraction entrapment electrophoresis,GELFrEE),基于蛋白質分子量的不同,對完整蛋白質進行分組,使用移液器在液相中回收蛋白質。該系統能在短時間內同時處理8個樣品。在3.5kDa—500kDa范圍內,相對于其它傳統分組方法,具有上樣量大、重現性好、分辨率高、回收率高、分離速度快和操作簡單的優點。能增大蛋白質組分析的覆蓋范圍,改善后期質譜分析的結果,提高蛋白質鑒定結果的可信度。
Gelfree 8100蛋白質分組系統由主機和8通道電泳槽兩部分構成。主機設計緊湊,能為8個獨立的電泳通道提供電壓。使用觸摸屏,可以設置電壓、分組數和使用的通道數等參數。運行過程中,觸摸屏實時顯示每個通道電泳狀態及電壓電流值。電泳槽由五個部分組成,分別是:陰極緩沖液槽、上樣槽、電泳凝膠管、樣品收集槽、陽極緩沖液槽。電泳凝膠管是內裝預制SDS-PAGE膠的玻璃管。緩沖液槽與上樣槽及收集槽之間由一個截留分子量為3.5kDa的膜分隔開。