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液相色譜與質譜聯用是大規模蛋白質鑒定的一種重要方法,在鑒定之前,需要對樣品進行一系列前處理。其中,蛋白質的酶切耗時最多,往往需要過夜水浴保溫處理,這大大限制了大規模蛋白質鑒定的速度,成了蛋白質組學研究的瓶頸。
蛋白質的二級結構主要由α-螺旋和β-折疊構成,由于疏水和親水基團的作用,在α-螺旋中,氨基酸形成緊密的堆積結構,使酶不容易接觸到內部的特異酶切位點,降低了酶切效率。經研究發現,蛋白質在微波的作用下,三維結構會被不同程度的破壞,從而對蛋白質起到解旋的作用,增加酶和酶切位點的接觸機會,大大提高膠內酶切和溶液內酶切的效率。
在對抗體進行分析(如測定分子量)前經常需要對抗體進行去糖基化。使用微波輔助酶切技術,同樣可以大大提高酶切效率。
HST公司開發的快速微波輔助酶切系統為蛋白質酶切提供了一個方便、高效、安全的解決方案。系統產生的高頻微波一方面對反應樣品和腔內水進行快速均勻的加熱,結合氣泡散熱效應,對腔內水進行強制循環并維持水溫誤差在±0.5℃內;一方面促進蛋白質解旋,增加酶和酶切位點的接觸機會,提高蛋白質酶切的效率。樣品架可同時容納樣品數量達96個,滿足高通量樣品處理的需要。
技術參數:
● 快速酶切時間:5—10分鐘
● 高通量樣品處理能力:一次處理多至96個樣品
● 3—5分鐘即可達到預設酶解溫度
● 溫度控制準確性:±0.5℃
● 使用方便:頂開蓋設計,操作簡單方便
● 高度的安全性:全封閉內腔,避免微波對外界的輻射
● 功率范圍:50—950W可調
● 樣品容器類型:離心管、96孔板或1升樣品瓶
● 使用微波加熱,結合氣泡效應對水進行冷卻和循環,確保樣品腔不同位置溫度均一,處理的結果的高度重現性